期刊简介

               《中国骨与关节杂志》基本情况介绍《中国骨与关节杂志》由国家卫生和计划生育委员会主管,中国医疗保健国际交流促进会、北京中科康辰骨关节伤病研究所主办,解放军总医院第一附属医院(304 医院全军骨科研究所)承办,目前已被中国科技论文统计源期刊 ( 中国科技核心期刊 )、美国化学文摘数据库收录。本刊以广大骨与关节疾病临床和基础研究工作者为读者对象。内容涵盖骨与关节疾病流行病学、诊断、药物治疗、手术治疗、骨科康复、骨科影像学及相关基础研究。本刊每期设一个重点号,报道国内外最新学术动态、临床诊治经验和基础科研成果。常设栏目有:述评、专论、论著、专题讲座、综述、临床研究与实践、骨科教案、标准·方案·指南、指南解读、读者• 作者• 编者、专家点评、病例报告等。本刊采用在线审编系统,不接受纸质投稿。投稿请登录《中国骨与关节杂志》网站 ( http://www.cjb304.com ) 进入远程稿件采编系统进行操作,稿件全文应采用 word97 版以上格式。                

首页>中国骨与关节杂志
  • 杂志名称:中国骨与关节杂志
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中国医疗保健国际交流促进会,北京中科康辰骨关节伤病研究所
  • 国际刊号:2095-252X
  • 国内刊号:10-1022/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
中国骨与关节杂志2004年第03期

介导尤文肉瘤融合基因的重组腺病毒的构建及其在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达

曲华毅;郭卫;李健;何湘君

关键词:腺病毒, 尤文肉瘤, 融合基因, 同源重组
摘要:目的构建尤文肉瘤融合基因EWS-FLI1重组腺病毒,并检测其在外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,为进一步进行尤文肉瘤的免疫治疗奠定基础.方法将质粒pEC1 EWS/FLI1酶切,切出的EWS-FLI1 cDNA片段克隆至腺病毒穿梭质粒padtrack-cmv的HCMV启动子下游.将连接后的穿梭质粒和骨架质粒Padeasy-1共同转化大肠杆菌BJ5183菌株,获得同源重组后的腺病毒质粒pAD EWS/FLI1.将此质粒转染293细胞,包装产生腺病毒Ad EWS-FLI1.扩增、纯化产生高滴度的Ad EWS-FLI1.转染PBMC,并通过RT-PCR和免疫组化法检测EWS-FLI1的表达.结果同源重组后产生的pAD EWS/FLI1经PCR鉴定构建成功,纯化后的滴度为4×1010/ml.转染PBMC后,RT-PCR证实有EWS/FLI1 mRNA的转录,免疫检测法检测在PBMC中有EWS/FLI1的表达.结论重组腺病毒Ad EWS/FLI1构建成功,并能在PBMC中稳定有效地表达,为进一步进行尤文肉瘤的免疫治疗研究奠定了基础.