期刊简介
《中国骨与关节杂志》基本情况介绍《中国骨与关节杂志》由国家卫生和计划生育委员会主管，中国医疗保健国际交流促进会、北京中科康辰骨关节伤病研究所主办，解放军总医院第一附属医院(304 医院全军骨科研究所)承办，目前已被中国科技论文统计源期刊 ( 中国科技核心期刊 )、美国化学文摘数据库收录。本刊以广大骨与关节疾病临床和基础研究工作者为读者对象。内容涵盖骨与关节疾病流行病学、诊断、药物治疗、手术治疗、骨科康复、骨科影像学及相关基础研究。本刊每期设一个重点号，报道国内外最新学术动态、临床诊治经验和基础科研成果。常设栏目有：述评、专论、论著、专题讲座、综述、临床研究与实践、骨科教案、标准·方案·指南、指南解读、读者• 作者• 编者、专家点评、病例报告等。本刊采用在线审编系统，不接受纸质投稿。投稿请登录《中国骨与关节杂志》网站 ( http://www.cjb304.com ) 进入远程稿件采编系统进行操作，稿件全文应采用 word97 版以上格式。
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首页>中国骨与关节杂志
- 杂志名称：中国骨与关节杂志
- 主管单位：国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中国医疗保健国际交流促进会，北京中科康辰骨关节伤病研究所
- 国际刊号：2095-252X
- 国内刊号：10-1022/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
转基因逆转椎间盘退变重组腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1的构建
谭江威；胡有谷；郑洪军；李书忠
关键词：椎间盘, 基因疗法, 腺病毒科, 转化生长因子β
摘要：目的构建一个高效的重组腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1,用于进一步的基因转移逆转椎间盘退变的实验研究.方法应用一种新的重组腺病毒构建系统来构建腺病毒载体.首先将hTGFβ1的cD-NA亚克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV上.重组穿梭质粒pShuttle-CMV-hTGFβ经PmeI酶切线性化后,与超螺旋的病毒质粒pAdEasy-1共转染大肠杆菌BJ5183.两种质粒在BJ5183中进行同源重组,重组病毒质粒pAd/CMV-hTGFβ1经卡那霉素平板筛选获得.经酶切分析鉴定后,重组病毒质粒用PacI酶切线化.线化的病毒质粒经脂质体转染293细胞(包装细胞系),于2周内收集重组病毒.结果重组腺病毒质粒经BamHI,PacI酶切鉴定,在0.8%的琼脂糖凝胶电泳中出现了诊断性片段;感染的293细胞出现了明显的细胞病变效应(CPE);PCR产物电泳证实了重组病毒的存在;免疫组织化学染色证实了hTGF-β1在293细胞中的表达.结论重组腺病毒载体Ad/CMV-hTGFβ1的获得以及目的基因表达的验证使下一步的逆转椎间盘退变的实验研究成为可能.
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